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中药渣-木霉菌双向发酵抗肠道病原菌的研究摘要摘要由于抗生素广泛使用导致肠道病原菌的耐药,造成土壤、水和食物的污染,严重危害饮食安全和人体健康。随着我国中医药事业的快速发展,中草药加工过程中产生的中药渣对环境造成了严重的污染。中药渣本身含有一定量的药物活性成分以及大量的纤维素、半纤维素、木质素、蛋白质、多糖以及多种微量元素等可利用成分。木霉菌来源广、种类多,环境适应性强,寄生范围广,生物安全性好,代谢产物功能众多,可分泌多种抗菌物质。通过真菌双向性固体发酵工程发酵药渣,木霉菌在生长过程中不仅对中药渣中的纤维素、糖类、蛋白等物质加以利用提高了药渣中活性成分的浓度,也为中药渣资源化的利用提供新的思路。目的:提出建立中药渣与木霉属真菌双向固体发酵体系以增强抑菌性的假设并通过实验验证,为寻找与开发抑制人类肠道病原菌的新型抗菌制剂提供依据,有望将其用于土壤细菌污染防治的发酵型修复剂,为土壤细菌污染的生物修复提供新思路。方法:从自然环境中筛选获得木霉菌菌株,通过对其溶血性观察、分解无机磷能力、分解纤维素能力并对其进行肠道耐药菌的抑菌性的研究,同时对木霉菌进行形态学及分子生物学鉴定。通过查阅相关文献,采用亚甲基蓝琼脂平板扩散法,根据抑菌圈的大小及颜色深浅综合评价抗菌活性,筛选出多种对肠道病原菌具有抗菌作用的中药渣。对筛选出的中药渣和木霉菌通过液体发酵初筛和固体发酵复筛,筛选出药渣-木霉发酵组合,并探究药渣-木霉发酵组合对肠道病原菌的抑菌性。(1)从自然环境中共筛选获得21株木霉菌菌株:(2)通过对木霉菌溶血性观察、分解无机磷能力、分解纤维素能力及其对肠道病原菌抑菌性的研究,从中选出BM-5、TY1、TR-33株木霉菌进行形态学及分子生物学鉴定。鉴定结果得到BM-5、TY1、TR-3均为木霉属真菌:(3)木霉菌对肠道病原菌有良好的抑菌作用,尤其是金黄色葡萄球菌:(4)抗菌药渣的筛选过程中,通过对近30种中药材抑菌性的研究,筛选出黄连、蒲公英、黄芩、甘草、黄柏、地锦草、五味子、青蒿、牡丹皮、马齿苋、连翘等18种对多种肠道病原菌具有抗菌作用的药渣:(5)对筛选出的药渣和木霉菌通过液体发酵初筛和固体发酵复筛,筛选出药渣-




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