维普论文检测系统VIP PAPER CHECK SYSTEM许晟-生物科学-SDS-PAGE凝胶电泳四种染色方法的比较【原文对照报告-大学生版】报告编号：65a3 adbade6a6a2d2检测时间：2021-04-2719：46：29检测字符数：9949作者姓名：许晟所属单位：蚌埠医学院全文总相似比复写率他引率自引率专业术语检测结论：23.71%22.71%1.0%0.0%0.0%其他指标：自写率：76.29%高频词：染色，凝胶，蛋白，实验，电泳典型相似文章：无指标说明：复写率：相似或疑似重复内容占全文的比重他引率：引用他人的部分占全文的比重自引率：引用自己已发表部分占全文的比重自写率：原创内容占全文的比重典型相似性：相似或疑似重复内容占全文总相似比超过30%专业术语：公式定理、法律条文、行业用语等占全文的比重总相似片段期刊：2博硕：134综合：0相似片段：154外文：0自建库：0互联网：18检测范围：中文科技期刊论文全文数据库中文主要报纸全文数据库中国专利特色数据库博士/硕士学位论文全文数据库中国主要会议论文特色数据库港澳台文献资源外文特色文献数据全库维普优先出版论文全文数据库互联网数据资源/互联网文档资源高校自建资源库图书资源古籍文献资源个人自建资源库年鉴资源IPUB原创作品时间范围：1989-01-01至2021-04-27维普论文检测系统VIP PAPER CHECK SYSTEM原文对照颜色标注说明：■自写片段■复写片段（相似或疑似重复）引用片段（引用）■专业术语（公式定理、法律条文、行业用语等）蚌埠医学院毕业论文姓名：许晟专业：生物科学年级：2017学号：11710910090指导教师：李睿蚌埠医学院教务处制年月日目录一、中文摘要、关键词3二、英文摘要、关键词3三、论文正文前言41.材料与方法62.结果123.讨论184.结论185.致谢196.参考文献20四种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法的比较摘要目的：将四种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法进行比较，分别是考马斯亮蓝染色，考马斯亮蓝机染，银染，KCL染色，从而寻找出一种简易，经济，可重复实验性高和高灵敏度的染色方法。方法：使用相同的凝胶，样品，MARKER,IgG,BSA进行电泳，分别染色，从凝胶染色时间，背景颜色，灵敏度及实验成本的角度对四种SDS-PAGE凝胶电泳快速染色脱色进行研究比较，并对其各自的优缺点进行分析比较。结果：这些染色方法在灵敏度、显色速度和经济价值方面仍有很大的差异。KCL染色不仅染色效果差，而且不稳定。几十分钟后，染色带会变浅，不能满足实验要求。虽然机染法可以快速脱色，同时确保一定的灵敏度，但单次实验成本太高，无法用于一般实验。考马斯亮蓝染色法和银染法虽然染色灵敏度高，但是耗费大量的时间，并且2维普论文检测系统VIP PAPER CHECK SYSTEM实验材料价格比较昂贵。相较于银染法和考马斯亮蓝染色法和KCL染色法，机染法易操作，用时短，能够快速得到染色结果，并且还能保证灵敏度，对于需要批量生产凝胶检测或是大批量检测蛋白样品的用户来说性价比很高。结论：机染法简易又快捷，重复试验性高，又能够保持较高灵敏度，可以应用在临床检测中，并且还有改进空间。关键词：SDS-PAGE:考马斯亮蓝：银染：KCL染色Comparison of four SDS-PAGE electrophoresis methodsABSTRACTObeject:To compare four SDS-PAGE gel electrophoresis staining methods,Coomassie brilliantblue,Coomassie brilliant blue,Silver dye,KCL staining,To find a simple,Economy,repeatableexperimental high and highly sensitive staining methods.Methods:Using the same gel,Sample,MARKER,IgG,BSA electrophoresis,Separate staining,Fromgel staining time,Background color,Four kinds of SDS-PAGE gel electrophoresis were studied andcompared in terms of sensitivity and experimental cost,and their respective advantages anddisadvantages are analyzed.Results:There are still significant differences in the sensitivity,color rendering speed andeconomic value of these staining methods.KCL dyeing is not only poor,And unstable.In a fewminutes,The stain will be shallow,Can not meet the experimental requirements.Although the dyeingmethod can quickly decolorize,While ensuring sensitivity,But the cost of a single experiment istoo high,Can not be used in general experiments.Coomassie brilliant blue staining and silverstaining although high staining sensitivity,But it takes a lot of time,And the experimentalmaterials are expensive.Compared with silver staining and Coomassie brilliant blue staining and KCLstaining,Machine dyeing is easy to operate,Short time,Can get the dyeing result quickly,And italso guarantees sensitivity,For users who need mass production of gel detection or mass detectionof protein samples,the cost performance is very high.Conclusion:Machine dyeing method is simple and fast,High repetition,Can also maintain highsensitivity,Can be used in clinical testing,And there is room for improvement.Key words:SDS-PAGE;Coomassie brilliant blue;silver KCL dyeing前言十二烷基疏酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE),简称SDS电泳[1]，主要用于蛋白质亚基分子量测定。SDS-PAGE凝胶电泳是定量、比较和识别蛋白质的常用方法。具有经济、速度、重复的特点。它可以根据蛋白质的分子量来分离。在现在的蛋白染色方法中，考马斯亮蓝染色法是最为常用的[2]，虽然这种方法染色时间较长，但是其染色效果好，又比较简便，且银染法染色虽然灵敏度很高[3]，但是实验试剂盒价格较高，实验操作步骤繁杂，实验时间较长，需要投入大量金钱和精力。所以在本实验中选择进行固定和染色，再脱色的方法，但由于条件有限，并没有使用加热等方法加快加速。但是考马斯亮蓝染色法染色时间长，虽然可以加快染色和脱色速度，但是实验操作复杂，实验时间跨度较大，且灵敏度较低，因此诞生了许多新的蛋白染色方法。现在市场有许多银染试剂盒[4幻，而实验中选择碧云天生物技术有限公司的快速银染试剂盒来进行染色。这种染色方法虽然灵敏度很高，但是实验试剂盒价格较高，并且实验操作步骤繁杂，实验时间较长，需要投入大量金钱和精力。因此不具备大范围推广的实用性。eStain2.0蛋白快速染色系统基于金斯瑞生物科技有限公司独创的蛋白电染专利技术，是一个高效的染色系统。将eStain蛋白染色正负极滤纸和跑好的胶组成三明治结构，放置在仪器的石墨正极和钛负极之间，通电后，eStain2.0蛋白染色仪配合含有正负极滤纸中的特定缓冲液，可在仪器的正负极之间形成一个很高的电场。在电场的驱动下，负极滤纸中带有负电荷的考马斯亮蓝染料分子发生定向移动，与胶上的蛋白分子结合，完成染色过程。未结合的染料分子继续移动，离开胶，完成染色。机染法染色迅速，操作简单，灵敏度理论上与考马斯亮蓝染色法相似。[5]虽然机染法利用的是考马斯亮蓝染色法的染色原理，但是利用强大的电场力，加快了考马斯亮蓝染料分子的移动，使得染脱色可以快速完成，解决了考马斯亮蓝染色法染色脱色耗时久的缺点。KCL可以和SDS进行反应形成聚合物，所以染色后整个胶体呈白色，洗脱后利用胶背景中SDS含量和结合在蛋白质3